Gebruikershandleiding voor het zaaien van cellen in een 5-laags celkweekkolf
1. Bereik celophanging van de vereiste concentratie, dan is het dan met medium zevenelijk in een container. Een volume van 30-50 ml per laagbegaande door lagen.
2. Slowlyadd de gemengde oplossing in de 5-laags celkweekfles met een serologische pipet. Om schuimplakken te voorkomen, wordt het aanbevolen om de pipet stevig tegen de wand in te stellen, de stream in staat te stellen langs de helling te stromen en elke keer een beetje vloeistof in de pipet te bewaren.
Opmerkingen: Hoewel 10 mlpipette candisperseth Mediumat de bodem, reikt A25ML -pipet alleen tot het nestmarkering om het medium te verspreiden.
3. Positioneer de meerlagige kolf rechtop met het nest dat je markeert, kantel het 45 ° met de klok mee en laat een tijdje in deze positie staan om de theeliquid in elke laag te nivelleren.
4. Leg het plat plat op de werkbank met nestmarkering omhoog.
5. Schud ItfromsIdetoside en schud de cellen gelijkmatig over kweekoppervlakken.
Opmerkingen: Wees voorzichtig toshake voorzichtig naar een foamor -bubbels en het morsen van vloeistof uit elke laag.
6. Transferthe Flask voor de incubator voor incubatie
Kweekmediumafname
1.Apiratie
Kantel de kolf45 ° met de klok mee met de nestmarkering naar u toe. Wijs in tegenstelling tot een hoek van 45 ° terwijl je het multi-flask naar je omkeert. Bekijk de serologische pipet vervolgens in de bodem voor volledig aspiratie.
2. Pouring
Kantel de kolf45 ° tegen de klok in met het nest dat u markeert, giet de uitgaven uit de kolf.
Tips: anest 10 ml serologische pipetis voorgesteld voor volledig aspiratie.
Celharvesting
1. Slin de resterende serumwith buffer af, voeg de spijsverteringsoplossing toe (≥5 ml per laag) en meng gelijkmatig. Volg vervolgens stappen 3-4 om te distribueren naar dissociërend reagens naar elke laag.
2. Laat 2 minuten staan, neutraliseer en meng vervolgens met inactiverende oplossing na stappen 3-4. Zwirt voorzichtig om cellen volledig los te maken.
3. Transfer de oplossing in een centrifugebuis of andere containers door aspiratie of gieten.
4. Richt de kolf drie keer op met buffer en breng de buffer vervolgens over in de centrifugebuis voor doorgang en tellen.
Tips: zoek video "Nest Multi-Layer Flask" op YouTube (@NestWuxi4075).
